Технологии автономной биолюминесценции, не чувствительные к активности метаболизма

Биолюминесценция лежит в основе ряда ключевых репортерных систем, используемых в биологии и медицине. Наиболее значимым ограничением существующих биолюминесцентных технологий является необходимость добавления к образцу синтетического субстрата для испускания света. Эта необходимость ограничивает применение существующих методов инвазивными лабораторными исследованиями. Недавно нашим научным коллективом были сделаны открытия, которые привели к появлению первой технологии эукариотической автономной биолюминесценции – то есть свечения, которое не требуют добавления синтетического субстрата извне, а основывается на его биосинтезе in situ. Эти новые технологии открывают возможности для создания организмов, сообщающих о практически любых физиологических событиях с помощью испускания света. Например, такие организмы могут использовать биолюминесценцию для визуализации патологического состояния, в долгосрочных неинвазивных исследованиях, для визуализации инфекций у растений и животных в реальном времени или для изучения физиологии растений и животных в их естественной среде, вне лабораторных условий. Однако, в настоящее время существующие технологии автономной биолюминесценции все еще далеки от уровня зрелости, необходимого для этих новых применений. В частности, эти технологии не подходят в качестве количественных репортеров, поскольку эмиссия света зависит как от экспрессии генов, так и от активности метаболизма. Настоящий проект направлен на преодоление этих ограничений путем систематической молекулярной инженерии ферментов автономной биолюминесценции. Проект приведет к разработке молекулярных инструментов, которые решат проблему зависимости биолюминесценции от метаболической активности и позволят проводить количественные измерения физиологических параметров с помощью биолюминесценции.

6 Января 2024 года — 31 Декабря 2027 года

Балакирева А.В. (рук.)

Лаборатория химии метаболических путей

Грант, РНФ

Список публикаций по проекту

  1. Morozov VV, Balakireva AV, Perfilov MM, Chepurnykh TV, Yampolsky IV, Sarkisyan KS, Mishin AS (2025). Constitutive Promoters Functional in Plant, Fungal, and Bacterial Hosts. ACS Synth Biol 14 (6), 2375–2379
  2. Wang T, Ge J, Qu C, Wang Z, Chen H, Li J, Wang S, Guan X, Chen T, Si Z, Hu K, Ding X, Liu L, Zhang J, Mishin AS, Yampolsky IV, Du H (2026). Expanding agroinfiltration host range with broad-spectrum effectors monitored by autoluminescent reporter. Hortic Res 13 (8), uhag126
  3. Balakireva AV, Karataeva TA, Karampelias M, Mitiouchkina TY, Morozov VV, Macháček J, Shakhova ES, Perfilov MM, Belozerova OA, Kovalchuk SI, Palkina KA, Drážná N, Vondráková Z, Müller K, Kalachova T, Fleiss A, Fernandez-Moreno JP, Alonso JM, Stepanova AN, Fakhranurova LI, Markina NM, Gorbachev DA, Bugaeva EN, Delnova GM, Choob VV, Yampolsky IV, Petrášek J, Mishin AS, Sarkisyan KS (2026). Non-invasive imaging of defence responses in plants. Nat Commun 17 (1),