Новые хаотропные смеси позволили упростить получение геномной ДНК из грибов для ПЦР
Исследователи из Лаборатории нейрорецепторов и нейрорегуляторов ИБХ РАН усовершенствовали метод получения образцов геномной ДНК из грибов для ПЦР-диагностики. Авторами проведен поиск специальных хаотропных смесей для получения высокоочищенных клеточных оболочек с ДНК за счет высокотемпературной экстракции РНК, белков и низкомолекулярных компонентов из биомассы дрожжей. Наиболее эффективной оказалась хаотропная смесь на основе 7М мочевины, 1% SDS, 100 мМ аммиака и 25 мМ цитрата натрия. Ее использование обеспечивало практически полное удаление РНК и липидов за 10 минут, и одностадийное получение ДНК-содержащих клеточных чехлов, которые можно непосредственно добавлять в реакционную смесь для ПЦР без дополнительной пробоподготовки. Разработанный подход перспективен для ПЦР-диагностики и таксономических исследований грибов и других микроорганизмов с прочной клеточной стенкой. Исследование опубликовано в журнале Analytica Chimica Acta. Подробнее
july 26, 2023