На пути к общему подходу к прототипированию терапевтически значимых пептидов и белков в бесклеточной системе трансляции
Ученые из Квинслендского технологического университета и Университета Квинсленда (Австралия), при участии сотрудника группы молекулярных инструментов для исследования живых систем ИБХ, разработали термодинамически контролируемый способ фолдинга пептидов и белков, синтезируемых in vitro и содержащих большое количество дисульфидных связей, с использованием условий, препятствующих агрегации. С этой целью система трансляции in vitro на основе E. coli была модифицирована так, чтобы обеспечивать одновременный с трансляцией «захват» транслируемых продуктов с помощью аффинной смолы. Данный подход снижает степень агрегации (поли)пептидов и обеспечивает эффективный окислительный фолдинг под термодинамическим контролем. Разработанный подход может найти применение для прототипирования широкого спектра пептидов, синтез которых ограничен наличием дисульфидных связей, макроциклических пептидов с неприродными связями и фрагментов антител в количествах, достаточных для анализа взаимодействия и оценки биологической активности. Работа опубликована в журнале Nature Communications (IF 14.919).
january 14, 2022